结直肠癌是世界规模内最多见的恶性肿瘤之一，具备很高的转移以及复发危害。因为传统疗法存于毒性、不耐受等错误谬误，临床成果不克不及使人满足。是以，火急需要辨认出敏感的CRC标志物，作为初期检测以及医治的新靶点。最近几年来，外泌体于癌症中的作用愈来愈遭到存眷。

于本篇文章中，上海同济年夜学医学院李冬传授以及孙祖俊传授等初次展现了癌症来历的外泌体circPACRGL于CRC增殖以及转移中起致癌作用，并为CRC医治提供了有价值的标记物。

1.CRC来历的外泌体能促成CRC的增殖、迁徙以及侵袭

作者从两种CRC细胞系上清中别离分散得到外泌体，颠末透射电镜、NTA以及WB鉴定后，确认已经分散出外泌体。随后，作者用外泌体处置惩罚对于应的CRC细胞，发明外泌体能显著促成CRC细胞增殖、迁徙以及侵袭，并削减凋亡。WB成果也显示，外泌体能晋升CRC细胞中BCL-二、 N-cadherin、Vimentin、MMP9卵白程度，以及降低E-cadherin、Cleaved-caspase三、Cleaved-caspase9卵白程度。裸鼠成瘤的成果注解，外泌体处置惩罚能较着增长HCT116细胞的转移。

Fig.1 CRC来历的外泌体能促成CRC的增殖、迁徙以及侵袭

2.circPACRGL于增添了肿瘤来历外泌体的CRC细胞中显著上调

作者接着别离用外泌体处置惩罚了HCT116以及SW480，网络了Ex-HCT116以及Ex-SW480细胞样本，再用未处置惩罚组做比照，举行了RNA二代测序。成果发明，circPACRG于Ex-HCT116以及Ex-SW480两组细胞中显著上调，再用RT-PCR验证了趋向是一致的。可是，作者用CRC病人血清来历的外泌体行止理CRC，获得的成果以及上述细胞中趋向纷歧致，猜度circPACRGL于血清外泌体中的表达差异可能与肿瘤构造特同性以及患者配景有关。作者进一步分散了CRC病人的肿瘤构造外泌体，qRT-PCR成果显示circPACRGL的表达于用肿瘤来历的外泌体处置惩罚的CRC细胞中显著上调。这些成果注解circPACRGL于受肿瘤来历外泌体刺激的CRC细胞中光鲜明显增长，而且circPACRGL可能来历在肿瘤来历的外泌体。

Fig.2 circPACRGL于增添了肿瘤来历外泌体的CRC细胞中显著上调

3.circPACRGL阐扬miR-142-3p以及miR-506-3p的海绵作用

荧光原位杂交成果显示，circPACRGL转录旌旗灯号重要漫衍于 HCT116 以及 SW480 细胞的细胞质中，少数于细胞核中。作者经由过程于线猜测，发明circPACRGL同时具备miR-142-3p以及miR-506-3p的联合位点。双萤光素酶陈诉检测进一步证明miR-142-3p以及miR-506-3p是circPACRGL的靶点。此外，作者发明于CRC来历外泌体刺激的HCT116以及SW480细胞中miR-142-3p 以及miR-506-3p表达均显著降低。

Fig.3 circPACRGL阐扬miR-142-3p以及miR-506-3p的海绵作用

4.TGF- 1是miR-142-3p/miR-506-3p的配合靶点

作者经由过程于线东西猜测，找到了TGF- 1是miR-142-3p以及miR-506-3p的一个最好配合靶点。接着作者经由过程萤光素酶陈诉检测、WB、qRT-PCR、miR-142-3p/miR-506-3p inhibitor等一系列试验验证了这一猜度，即TGF- 1是mir -142-3p以及miR-506-3p的配合靶点。

Fig.4 TGF- 1是miR-142-3p/miR-506-3p的配合靶点

以及元生物可提供外泌体分散、透射电镜、纳米粒径阐发、WB标记物检测、外泌体流式检测、外泌体示踪、外泌体对于细胞功效学影响、外泌体植物打针、活体成像、病理等办事。

5.circPACRGL经由过程调控miR-142-3p/miR-506-3p-TGF- 1轴促成CRC增殖、迁徙以及侵袭

作者猜度circPACRGL可能经由过程miR-142-3p/miR-506-3p-TGF- 1轴调控CRC的增殖、迁徙以及侵袭。因而作者设置了差别的试验调控前提，即CRC来历的外泌体处置惩罚、circPACRGL敲低、miR-142-3p inhibitor 处置惩罚、miR-506-3p inhibitor处置惩罚、TGF- 1过表达等，别离对于细胞举行分组检测，不雅察差别组另外细胞增殖、迁徙以及侵袭变迁。作者的数据注解circPACRGL经由过程调控miR-142-3p/miR-506-3p-TGF- 1轴促成了CRC的增殖、迁徙以及侵袭。

Fig.5 circPACRGL经由过程调控miR-142-3p/miR-506-3p-TGF- 1轴促成CRC增殖、迁徙以及侵袭

6.CRC来历的外泌体circPACRGL经由过程miR-142-3p/miR-506-3p-TGF- 1轴调治N1-N2中性粒细胞的分解

有报导称，高程度的TGF- 1与肿瘤的发生成长及N1向N2中性粒细胞表型转换有关。作者经由过程流式细胞术检测上述差别组别中N2中性粒细胞的比例。成果注解，CRC来历的外泌体circPACRGL可以经由过程miR-142-3p/miR-506-3p- TGF- 1调治中性粒细细胞的N1-N2分解。

Fig.6 circPACRGL经由过程miR-142-3p/miR-506-3p-TGF- 1轴调控N1-N2中性粒细胞于小鼠结肠癌细胞中的分解

本文展现了肿瘤来历的外泌体可以携带circRNAs进入肿瘤中性粒细胞，并经由过程海绵接收miRNAs调控TGF- 的表达，进而促成中性粒细胞由N1型向N2型转化，终极致使肿瘤的发生成长。是以，本研究注解，circPACRGL-miR-142-3p/miR-506-3p-TGF- 1轴多是一种颇有远景的CRC医治计谋。

Fig.7 图示归纳综合了circPACRGL经由过程miR-142-3p/miR-506-3p-TGF- 1轴调控N1-N2中性粒细胞于癌症进展中的分解

参考文献：

Mol Cancer. 2020 Jul 27;19(1):117.doi: 10.1186/s12943-020-01235-0. Exosomal circPACRGL promotes progression of colorectal c.ancer via the miR-142-3p/miR-506-3p- TGF- 1 axis